El muestreo selectivo de proteínas residuales está bajo la mirada de los estándares internacionales por su efectividad en áreas ocultas al ojo humano en grietas y espacios internos. El Dr. Juan Díaz del especialista en control de infecciones Terragene presenta una alternativa.

Los procesos de limpieza de instrumentos y materiales para uso médico deben controlarse a fondo, ya que sus resultados determinan el éxito posterior de los procesos de desinfección y / o esterilización.

Una práctica común es confiar en la inspección visual para detectar niveles residuales de suciedad. Sin embargo, este método tiene baja sensibilidad, es subjetivo y puede estar influenciado por una serie de factores que incluyen la intensidad y la naturaleza de la iluminación en el área de inspección. Además, esta metodología se vuelve irrelevante en casos de instrumentos con grietas, juntas, lúmenes, etc., donde el ojo humano no puede detectar la suciedad.

Idealmente, la verificación de la limpieza por parte de los usuarios debe incluir tres metodologías básicas. En primer lugar, la inspección visual combinada con otros métodos de verificación que permiten evaluar tanto las superficies externas como los espacios y canales internos de los dispositivos médicos. A continuación, verificando la eficiencia de limpieza del equipo. Y, por último, controlar los parámetros clave de limpieza (p. Ej. Temperatura, tiempo).

Hoy en día, la detección de proteínas derivadas de la sangre y otros fluidos en las superficies de los instrumentos quirúrgicos ha ganado gran importancia debido a los continuos riesgos de transmisión de agentes proteicos infecciosos, como los priones (causas de encefalopatías espongiformes transmisibles, como la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob). )

Además, las proteínas son uno de los componentes de la suciedad residual que presenta el mayor desafío para la limpieza, debido a su alta adhesión, especialmente cuando se someten a un proceso de desnaturalización debido a las altas temperaturas (por ejemplo, en la desinfección térmica).

La detección de proteínas derivadas de la sangre y otros fluidos en las superficies de los instrumentos quirúrgicos ha ganado gran importancia debido a los continuos riesgos de transmisión de agentes proteicos infecciosos.

Actualmente, la metodología más utilizada para la detección de proteínas residuales se basa en el muestreo selectivo de los lugares más desafiantes en los instrumentos (grietas, articulaciones, lúmenes, espacios internos, etc.) a través de sistemas que utilizan la técnica de torunda.

Estándares controvertidos

Las diferentes regulaciones internacionales se refieren a las posibles metodologías a utilizar para cuantificar los residuos de proteínas en los instrumentos quirúrgicos después de la etapa de lavado. ISO 15883-1 describe los requisitos generales, términos, definiciones y pruebas que se aplicarán en los procedimientos que utilizan lavadoras desinfectadoras. El estándar internacional de referencia recomienda tres métodos de prueba para la detección y evaluación de la contaminación residual de proteínas: los métodos se basan en las reacciones de Ninhidrina, OPA (ortoftaldehído) y Biuret.

Este reglamento recomienda el uso de la metodología de hisopos para los dos métodos en los que es posible usarlo, Ninhydrin y Biuret, y luego establece los límites de aceptación para ellos.

Diferentes estudios, de Lombardo et al. en 1995 a Holmes et al. En 2017, resalte que el uso de la técnica de hisopo se recomienda para la detección de proteínas residuales, e incluso las regulaciones más ampliamente reconocidas en todo el mundo, recomiendan el uso de esta técnica. Estos incluyen ANSI / AAMI, FDA, SHTM 01-01, Health Canada y HTM 01-06.

Se recomienda el método de torunda, ya que es capaz de detectar proteínas en lugares de difícil acceso, como en instrumentos con partes porosas, elementos canulados o los canales de un endoscopio.

Un caso particular representa el Memorando Técnico de Salud (HTM), que se implementa en el Reino Unido como regulaciones para el manejo y la descontaminación de instrumentos quirúrgicos (dispositivos médicos). En las secciones 1–6, se recomienda el uso del método de torunda, ya que puede detectar proteínas en lugares de difícil acceso, como en instrumentos con partes porosas, elementos canulados o los canales de un endoscopio.

¿Te gusta esta historia? Suscríbase a la revista Cleanroom Technology para un análisis incisivo de las últimas noticias y desarrollos en industrias de alta tecnología que fabrican en entornos controlados.

La información utilizada para desaconsejar la técnica de torunda en este memorándum se basa en un documento titulado «Evaluación crítica de la ninhidrina para monitorear la descontaminación de instrumentos quirúrgicos» por Nayuni et al. en 2013. Este trabajo señala correctamente que el método de Ninhidrina no alcanza el nivel de sensibilidad requerido por el estándar (≤ 5 µg por lado del instrumento, HTM 01-01: 2016), pero luego asocia erróneamente esta falta de sensibilidad con La técnica del hisopo. De hecho, no especifica la técnica utilizada para realizar el frotis, un punto determinante a tener en cuenta debido a la gran dispersión en las tasas de recuperación de proteínas obtenidas por las diferentes formas de usar el hisopo y sus suplementos.

Una de las mayores controversias sobre este memorándum se centra en la incapacidad del método de detección in situ para ser utilizado en una amplia gama de elementos que deben ser probados de acuerdo con el estándar. Estos incluían aspectos como las paredes de las cámaras de la lavadora, los vagones de carga, los materiales porosos, las bisagras, los elementos canulados y los instrumentos de gran volumen (para dar solo algunos ejemplos). Por esta razón, esta metodología se vuelve inviable para una gran cantidad de instrumentos utilizados en una planta de esterilización.

La penetrabilidad del reactivo OPA en la capa de suciedad puede no ser completa debido a su grosor y composición, por lo que no es posible determinar a priori qué porcentaje de las proteínas se tienen en cuenta en el momento de la cuantificación.

Un material poroso absorbe una mayor cantidad de suciedad que se aloja en los poros, y que la solución fluorescente no puede alcanzar, lo que lleva a una subestimación de la cantidad de proteína detectada.

La porosidad del material a probar es una limitación crítica en este sistema. Un material poroso absorbe una mayor cantidad de suciedad que se aloja en los poros, y que la solución fluorescente no puede alcanzar, lo que lleva a una subestimación de la cantidad de proteína detectada. Esto conduce a resultados erróneos y provoca resultados falsos negativos, con todas las graves repercusiones que esto conlleva para los pacientes.

Las limitaciones antes mencionadas hacen que la detección de proteínas in situ sea una metodología que no es muy aplicable para el Departamento Central de Servicios Estériles cuando se trata de probar la mayoría de los instrumentos quirúrgicos y sus complementos, para garantizar una prueba de limpieza correcta.

El método ideal es el que emplea la técnica de hisopo de superficie (adecuado para cualquier tamaño y complejidad de instrumento), que utiliza una alternativa a las reacciones OPA y Nihindrina

Para todo lo mencionado anteriormente, el método ideal es el que emplea la técnica de hisopo de superficie (adecuado para cualquier tamaño y complejidad de instrumento), que utiliza una alternativa a las reacciones OPA y Nihindrina, como la reacción de Biuret, y que es capaz de cuantificar con una sensibilidad ≤ 5 µg de proteínas por lado del instrumento.

Terragene SA propone el uso de su sistema Chemdye PRO1 MICRO para la detección y cuantificación de proteínas en superficies de instrumentos, cumpliendo con las características mencionadas anteriormente y con las regulaciones internacionales.(Bioescol  también utiliza el sistema de Chemdye PRO1 MICRO  para garantizar la seguridad del paciente)

Además, está hecho de una combinación de un hisopo altamente abrasivo y una solución humectante especialmente formulada que garantiza una recuperación de proteínas de más del 85%. Representa una opción fácil, rápida y precisa para monitorear la limpieza de dispositivos médicos reutilizables en el contexto de prácticas médicas, dentales e industriales basadas en la detección y cuantificación de proteínas de superficie, alérgenos y agentes reductores.

Fuente : Terragene